顯微鏡資訊:在光學顯微鏡下對樣品橫截面和縱向切片
在光學顯微鏡下觀察樣品的橫截面和縱截面
標本制備
所有組織學、組織化學和免疫組織化學研究都可以在冷凍標本上。體視顯微鏡一臺儀器。指從不同角度觀察物體,使雙眼引起立體感覺的雙目顯微鏡。偏光顯微鏡用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種顯微鏡。這種顯微鏡的載物臺是可以旋轉(zhuǎn)的,當載物臺上放入單折射的物質(zhì)時,無論如何旋轉(zhuǎn)載物臺,由于兩個偏振片是垂直的,顯微鏡里看不到光線,而放入雙折射性物質(zhì)時,由于光線通過這類物質(zhì)時發(fā)生偏轉(zhuǎn),因此旋轉(zhuǎn)載物臺便能檢測到這種物體。生物顯微鏡用來觀察生物切片、生物細胞、細菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究,同時可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細小顆粒等物體。左圖所示為生產(chǎn)的倒置生物顯微鏡型,該生物顯微鏡也是食品廠、飲用水廠辦QS、HACCP認證的必備檢驗設(shè)備。而固定石蠟包埋會破壞纖維的結(jié)構(gòu),所以無法用這些標本研究酶和代謝。根據(jù)抗體的性質(zhì),可以用儲存的石蠟包埋材料一些免疫組織化學染色,但很難一系列完整的研究。在光學顯微鏡下,橫切面比縱切面能提供更多的信息。
理想的標本處理企業(yè)應(yīng)在取材后盡快冷凍,尤其是中國計劃我們要做一個生物學習化學教學研究時,但單純形態(tài)學分析研究問題可以用從異地運輸來的標本,必要時用輕輕沾濕的紗布包起來,防止干燥,但延誤不要超過幾個小時。外地運輸來的標本因為變性的存在而影響學生生物化學技術(shù)檢查,任何一種形式的商業(yè)化運輸方式方法都一樣。從尸體解剖結(jié)構(gòu)材料管理可以自己獲得更多一些社會有意義的信息,但酶組織環(huán)境化學染 色幾乎不能做。一些相關(guān)蛋白的免疫細胞組織發(fā)生化學染色如肌球蛋白和層粘連蛋白水平可以在死后的解剖標本中發(fā)現(xiàn),但是肌營養(yǎng)不良素和胞漿膜蛋白在尸體解剖材料已經(jīng)不能被檢出,主要內(nèi)容取決于標本從患者對于死亡到冷凍的時問長短。
將試樣直接浸入液氮中會在試樣周圍產(chǎn)生氣態(tài)氮,從而延遲試樣的凍結(jié)過程。 更快的冷凍過程和保存組織結(jié)構(gòu)的更好方法是將異戊烷在液氮中預(yù)冷至1609c。 異戊烷首先包含在容器中,然后浸入液氮中直到完全固體,然后再加熱到固體和液體共存的點。
我們通常將試樣固定在標有試樣名稱的軟塞上,這樣試樣就可以很容易地從恒冷切片機的卡盤上取出并且容易保存。標本放置在一個軟插頭和 Oct 固定劑是放在周圍的基礎(chǔ)標本。然后將帶有試樣的軟塞置于液體異戊烷中。冷卻時間必須根據(jù)經(jīng)驗,部分取決于樣品的大小,通常10-20秒就足夠了。如果時間太短,會造成肌纖維中冰晶的假象,如果時間太長,標本就會斷裂。在準備切片之前,冷凍組織塊在攝氏40度或更低的溫度下儲存。長期儲存的樣品*好放在液氮中,以免因停電造成損失。在切片之前,軟塞被凍結(jié)在切片機的標本架上。切片后,